Når du håndterer mikroorganismer, er det vigtigt at bruge aseptisk teknik korrekt-både for at forhindre dine mikroorganismer i at blive forurenet af ydre kræfter, såvel som for at beskytte dig selv og mennesker omkring dig.
Trin
Trin 1. Beskyt dig selv
Bind langt hår, og brug en laboratoriefrakke og beskyttelsesbriller.
Trin 2. Vask dine hænder og dit arbejdsområde
Vask dine hænder med vand og sæbe, og sprøjt ned på bænken med 70% ethanol.
Trin 3. Læg alt dit udstyr ud
Sørg for, at du har alt klar til start, inden du starter.
Trin 4. Tænd bunsenbrænderen så højt som muligt
Du skal bruge det til at sterilisere dit udstyr, og det opadgående træk forhindrer forureninger udefra i at lande på din kultur.
Drej kraven, så luftstrømmen er helt åben
Trin 5. Steriliser inokulationssløjfen
Hold den i en vinkel på cirka 45 ° nedad og bevæg den langsomt gennem flammen, så den lyser rødhvid.
- Det er lettest at holde sløjfen mellem din tommelfinger og pegefinger og støtte den med din langfinger.
- Den varmeste del af flammen er lige ved spidsen af den indre, blå ildkegle.
Trin 6. Brug din anden hånd til at få fat i din oprindelige kultur
- Hvis det er en tallerken, skal du holde den og vende låget op lige nok til at få løkken indeni.
- Hvis det er et rør med låg, skal du bruge den lyserøde finger på den hånd, du holder inokulationssløjfen med til at fjerne låget, og derefter trække åbningen af røret hurtigt gennem bunsenbrænderens flamme to gange. Dette kaldes flammende og afliver alt, der ønsker at komme ind i røret, og skaber en konvektionsstrøm, der tvinger luft ud af røret, så intet kan få det. Bliv ved med at holde på låget med din pink i det følgende trin.
Trin 7. Inokuler
Tryk på inokulationssløjfen til en koloni, du vil hente. Hvis du inokulerer fra flydende bouillon, skal du dyppe inokulationssløjfen ned i røret og ryste sløjfen for at sikre, at du får nok bakterier.
Trin 8. Luk den oprindelige kultur
Hvis det er en tallerken, skal du bare lukke låget og lægge det tilbage. Hvis det er et rør, skal du trække åbningen gennem bunsenbrænderens flamme to gange og derefter lægge låget på igen.
Trin 9. Åbn den nye plade
Som før skal du bruge din frie hånd til at åbne låget lige bredt nok til at få løkken ind
Trin 10. Plader bakterierne
Stryg inokulationssløjfen let over overfladen, pas på ikke at trænge igennem agaren.
Et almindeligt stribemønster er kvadrantmetoden
Trin 11. Luk pladen
Trin 12. Steriliser inokulationssløjfen
Som før, hold den i en 45 ° nedadgående vinkel og bevæg den langsomt gennem flammen, så den bliver rødhvid varm.
Tips
- Generelt er handsker ikke nødvendige. Alle ovenstående trin tjener til at beskytte både dig selv og dine bakterier, så risikoen for kontaminering er meget lav. Handsker kan give grimme forbrændinger, hvis du ved et uheld rører dem med den varme inokulationssløjfe.
- Husk, at du arbejder med ild. Det er ikke en stor ting, bare vær sikker på at du ved, hvad du skal gøre, hvis du brænder dig selv; afbryde eksperimentet, skyl forbrændingen med vand og underret om nødvendigt din vejleder.
- Hvis du laver flere kørsler med at skulle bruge aseptisk teknik, er det ikke nødvendigt at slukke bunsenbrænderen helt mellem kørslerne - bare skru den ned til pilotflammen og sluk den kun helt, når du er helt færdig.
